刺客3剧情设定在1753年至1783年间，场景主要发生在纽约和波士顿。

主角是一位叫Connor（康纳）的英美混血儿。在《刺客信条3》的开局阶段，玩家将体验Conner的童年，当时他由莫霍克族（原住纽约州的印第安人）抚养长大。在英国殖民者进攻并烧毁了Conner的村庄后，他最终走上一条对抗暴政（和圣殿骑士）的道路。本作的故事仍然以刺客组织与圣殿骑士的斗争为主线。

看过国外的视频，刺客3加入了“猩猩爬”的技能、上树技能、用绳子勒死敌人的技能。可玩性相当高。